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上海通蔚生物elisa檢測試劑盒組成技術原理
更新時間:2023-08-04   點擊次數:662次

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試驗原理

elisa檢(jian)測試劑(ji)盒試劑(ji)盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知(zhi)濃(nong)(nong)度(du)的標準(zhun)品(pin)(pin)、未知(zhi)濃(nong)(nong)度(du)的樣品(pin)(pin)加(jia)入(ru)微孔酶標板內進行檢(jian)測。洗滌后(hou),加(jia)入(ru)親和(he)素標記過的HRP。再經過溫(wen)育(yu)和(he)洗滌,去除(chu)未結(jie)合的酶結(jie)合物(wu)(wu),然(ran)后(hou)加(jia)入(ru)底物(wu)(wu)A、B,和(he)酶結(jie)合物(wu)(wu)同時作用。產(chan)生顏色。顏色的深淺和(he)樣品(pin)(pin)中的濃(nong)(nong)度(du)呈比例(li)關系。


組(zu)成結構(gou)

1、 血清:操作過程中避免任何細胞(bao)(bao)刺激(ji)。使用不(bu)含(han)熱原和(he)內毒(du)素的試管。收集(ji)血液后,1000×g離心10分鐘(zhong)將血紅細胞(bao)(bao)迅速(su)小(xiao)心地分離。

2、血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素(su)血漿可用于(yu)檢(jian)測。1000×g離(li)心30分鐘去除顆粒。

3、細胞上清液(ye):1000×g離心10分鐘去除顆粒和(he)聚合物(wu)。

4、組(zu)(zu)織(zhi)勻漿:將組(zu)(zu)織(zhi)加(jia)入適量(liang)生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。

5、保存:如果樣品不(bu)立即使用,應(ying)將其(qi)分成(cheng)小部分-70℃保存,避免反復冷凍(dong)。盡可能的(de)不(bu)要(yao)使用溶血(xue)(xue)或高血(xue)(xue)脂血(xue)(xue)。如果血(xue)(xue)清中大量顆(ke)粒(li),檢測(ce)前先離心或過濾。不(bu)要(yao)在(zai)37℃或更(geng)高的(de)溫度加熱解(jie)凍(dong)。應(ying)在(zai)室溫下解(jie)凍(dong)并確保樣品均勻地充分解(jie)凍(dong)。


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安(an)全性

1. 避免直接接觸終止液(ye)和底物A、B。一旦(dan)接觸到這些(xie)液(ye)體,請盡快用水沖洗。

2. 實驗中(zhong)不要吃喝、抽煙或使用(yong)化(hua)妝品。

3. 不要用嘴吸(xi)取試(shi)劑盒(he)里的任何成份。

4. 試劑應(ying)按(an)標簽(qian)說(shuo)明書(shu)儲存,使(shi)用(yong)前恢復到室溫。稀稀過后的(de)標準品(pin)應(ying)丟(diu)棄,不(bu)可保存。

5. 實驗中不用的板(ban)條(tiao)應立(li)即放回包裝袋中,密封保存(cun),以免變(bian)質。

6. 不用的其它試(shi)劑應包(bao)裝好或蓋好。不同批號(hao)的試(shi)劑不要混用。保質前使用。

7. 使用一次性的吸頭以免(mian)交叉污(wu)染,吸取(qu)終止(zhi)液和底物A、B液時,避免(mian)使用帶金屬部分的加(jia)樣器。

8. 使用干(gan)凈的(de)塑料容器(qi)配置洗(xi)滌液(ye)。使用前充(chong)分(fen)混勻試劑盒里的(de)各種成份及樣品(pin)。

9. 洗滌酶(mei)標(biao)板時應(ying)充(chong)分拍干,不(bu)要(yao)將(jiang)吸水(shui)紙直(zhi)接(jie)放入酶(mei)標(biao)反應(ying)孔(kong)中吸水(shui)。

10. 底物(wu)A應揮發,避免(mian)長時(shi)間(jian)打開蓋(gai)子(zi)。底物(wu)B對(dui)光(guang)敏感,避免(mian)長時(shi)間(jian)暴(bao)露于光(guang)下(xia)。避免(mian)用手接觸(chu),有(you)毒。實驗完成(cheng)后應立即讀取OD值。

11. 加入試劑的(de)順(shun)序(xu)應一致,以保證所有(you)反(fan)應板孔溫育(yu)的(de)時間一樣。

12. 按照說明書(shu)中(zhong)標明的時(shi)間、加液的量及(ji)順(shun)序進行(xing)溫育操(cao)作。


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上海通蔚生物科技有限公司

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